一、噬菌体展示技术的基本原理

噬菌体展示是一种高效筛选抗体的技术，通过将抗体基因片段展示在噬菌体表面，结合高通量淘选快速获得高亲和力抗体。通过将抗体基因与噬菌体外壳蛋白基因融合，使抗体片段(如scFv、Fab)展示在噬菌体表面，从而实现从庞大文库中筛选高亲和力抗体的目标。该技术广泛应用于药物研发、诊断及基础研究，具有高效、多样性和灵活性等优势，是抗体发现的重要工具。

1.文库构建与表面展示

将抗体基因插入噬菌体展示载体(如phagemid)，与pIII蛋白融合。再将噬菌体质粒转化至大肠杆菌后，通过辅助噬菌体(如M13KO7)提供复制和包装所需蛋白，生成展示抗体的噬菌体颗粒。

①基因融合：抗体可变区基因(VH/VL)与噬菌体外壳蛋白基因(如M13噬菌体的pIII蛋白)融合，形成噬菌体展示载体。

②表面展示：在噬菌体组装过程中，抗体片段与外壳蛋白共表达，呈现在噬菌体颗粒表面。

③基因型-表型耦联：每个噬菌体携带编码其展示抗体的DNA，实现表型与基因型的直接关联。

2.筛选流程

①结合：噬菌体文库与固相化抗原(如包被在孔板或磁珠上的抗原)孵育。

②洗涤：去除未结合或弱结合的噬菌体。

③洗脱：通过酸解(如甘氨酸缓冲液)或竞争性抗原释放高亲和力噬菌体。

④扩增：感染大肠杆菌扩增富集的噬菌体，进行多轮筛选(通常3-5轮)。

载体构建：将抗体基因插入噬菌体展示载体(如phagemid)，与pIII蛋白融合。

3.克隆分析与验证

①测序：对筛选后的噬菌体DNA测序，分析抗体序列多样性。

②功能验证：通过ELISA、SPR(表面等离子共振)或细胞结合实验验证亲和力及特异性。

二、噬菌体展示平台的优势

1.周期短、成本低

相比于传统的杂交瘤技术等方法，噬菌体展示技术筛选过程相对较短，最快1周即可获得候选分子；所需的实验材料主要是噬菌体和细菌，操作简单且费用低，适合大规模初筛。

2.可大规模筛选高特异性抗体

噬菌体展示技术能够在短时间内对数以百万甚至数十亿计的噬菌体克隆进行筛选，能针对几乎任何靶点包括毒素、病原菌和高度保守靶点（如泛素、组蛋白），快速获得与目标抗原特异性结合的抗体，大大提高了筛选的效率和速度。

3.空间构象的准确性

噬菌体展示的抗体能够保持相对独立的空间结构和生物活性，这有利于筛选出具有正确构象和功能的抗体。

4.兼容性强

可展示scFv、Fab、纳米抗体等多种抗体形式，并支持多价展示(如pVIII蛋白多拷贝展示)。

三、噬菌体展示人源scFv/Fab抗体库技术流程

四、仁域生物优势-全新升级优化的技术路线+万亿级全人源抗体库

1.抗体库多样化：包含Fab、scFv、VHH等。

2.宿主来源多样化：包含人、鼠、兔、骆驼、羊驼等。

3.全新升级的全人源抗体库引物：引入IMGT最新数据，优化简并度提升扩增效率，多样性更好。

4.极限提升的电击转化效率：单次电击转化效率高达到 1×10^10 。

5.十年技术积累：累计完成1000+ scFv/Fab/VHH Library；经验丰富的团队，以及对抗体库技术的深入理解，为您打造更高品质噬菌体展示抗体库。

6.服务可定制：仁域生物针对不同的要求提供专业的优化建库方法，为每一个客户量身定制实验方案，提供最高品质的抗体库定制服务，满足每一位客户的特殊需求。

五、交付内容