一、免疫动物的选择
1.Alpaca和Camel的对比
目前，中国处在临床前和临床试验阶段的纳米抗体药物已有约100个，早期研发阶段的纳米抗体发现项目更是数量庞大。而绝大多数纳米抗体发现依赖于羊驼/骆驼。这两种动物属于远交物种，遗传差异较大（如下表），导致在免疫效果上差异明显，客户可根据实际需要进行选择。
此外，Camel在我国主要分布在内蒙古，宁夏，甘肃等地，不需要依赖进口，养殖便利、产业链齐全，价格相对Alpaca和Llama的成本更为便宜。此外，Camel生长环境的特殊性因素，使得体内的单域抗体的结构更为稳定，多样性更为丰富，更适合用来进行动物免疫和构建纳米抗体库。
2.Camel单域抗体特点
①单域抗体的含量：Camel体内的单域抗体含量最高，约占整个IgG型抗体的70%，相较于Alpaca和Llama更为显著。
②单域抗体二硫键的丰度：Camel，Alpaca，llama 不同来源的单域抗体额外二硫键丰度上有很大的不同。Camel 额外二硫键占比达到80%以上，Alpaca与llama、比较低10%左右。额外的二硫键，使抗体更加稳定，同时稳定了CDR3的构象。
③单域抗体的多样性：Camel单域抗体含量高，且抗体Germline更丰富，共计34条，Alpaca有17条，llama5条。
④单域抗体的人源化程度：Camel VHH与Human VH同源性在67.5%~74.3%之间，而Alpaca，Llama与Human VH的同源性在80%~87.3%之间。
二、动物免疫
1.优点
①天然产生重链抗体：羊驼及骆驼拥有天然产生重链抗体（HCAbs）的能力，其可变区（VHH）经过优化后即为功能性纳米抗体。这种天然机制使得从羊驼/骆驼体内筛选高亲和性、稳定的纳米抗体成为可能。
②成熟的免疫方法：多年来，利用羊驼/骆驼进行免疫、采集外周血淋巴细胞以及构建噬菌体展示文库的方法已较为成熟，技术路线清晰。
③多样性和高亲和力：经过多次免疫和体内天然成熟过程后，羊驼/骆驼获得的纳米抗体往往具有较高的亲和力和特异性，适合下游工程化改造和药物开发。
2.缺点
①成本与周期：羊驼/骆驼作为大型动物，其饲养、免疫、样本采集和动物福利管理成本较高，且免疫周期较长，不利于高通量和快速筛选。
②驼源纳米抗体的结构问题：驼源纳米抗体框架FR2区独特的亲水氨基酸、较长的CDR3，且多数驼源纳米抗体序列多一对二硫键，这些特点使驼源纳米抗体稳定性较好，但这也是驼源纳米抗体ADA风险较高的主要因素，在人源化改造时很难降低这些ADA风险，如果强行修改，会严重影响抗体的活性及稳定性。
③动物伦理问题：随着科研和商业需求的激增，部分机构可能存在对同一只羊驼重复免疫的现象，这不仅引发伦理争议，也可能影响抗体质量与动物健康。
④个体差异：由于天然免疫过程存在个体间的差异，可能导致不同羊驼/骆驼产生的抗体库在多样性和亲和力上存在一定波动。
3.乱象
①抗体序列重复与知识产权危机：由于动物可能在不同地方多次流转，其免疫史往往不透明。可能出现同一只动物被用于多个项目，导致不同团队筛选出相同或高度相似的抗体序列。这不仅影响了新药研发的独特性，还可能在药物研发的后续阶段引发归属权争议，导致大量候选药物面临专利无效风险。
②研发成本隐性增加：企业需投入更多资源验证抗体序列的唯一性，且一旦抗体的知识产权发生纠纷，将给研发企业带来难以估量的经济损失，甚至影响整个项目的推进，间接推高研发成本。
③抗体库多样性下降：重复免疫的动物可能会在体内形成高水平的抗体库，导致动物体内抗体库的框架区（FR）基因趋同，某些高表达的抗体框架占据主导地位，限制抗体结构多样性，使得新抗体的产生受限，从而影响抗体库中目标抗体的占比。这不仅会影响抗体的质量，导致抗体亲和力不足或功能单一化，甚至会降低筛选效率。
④动物福利与健康隐患：频繁免疫可能对动物健康造成负面影响，免疫流程的标准化缺失可能加剧这一风险。
三、仁域生物优势-双物种免疫+天然库辅助筛选
仁域生物在纳米抗体发现领域深耕多年，在成都龙泉驿区设有符合试验动物标准的骆驼繁育及实验基地，保证提供的免疫动物百分百是未免疫的羊驼/骆驼，从源头上确保免疫史的清晰可控，为抗体发现提供稳定可靠的基础。并始终坚持抗体序列的百分百交付，不进行二次使用，确保抗体归属的唯一性。
1.服务内容
①根据靶点特性制定免疫方案。
②使用未经免疫的驼科动物进行免疫。
③血液样本采集与血清效价检测。
④动物PBMC分离与保存。
2.服务优势
①保证动物零背景：从源头保护客户知识产权。
②丰富多样化的抗原免疫形式：可溶性蛋白、多肽、细胞、VLP蛋白、mRNA、DNA、腺病毒载体等。
③根据靶点特性为客户提供定制化免疫方案。
④天然库辅助筛选：免疫定制均赠送一次数万亿级骆驼抗体库辅助筛选。
四、服务流程
仁域生物可为客户提供未经免疫的，足龄（24-36月龄）的骆驼进行抗原免疫，按照标准免疫方法，每个项目免疫5-6针，免疫期间为客户提供ELISA效价测定服务，保证抗血清ELISA效价合格后采血分离PBMC。
五、案例分享
