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全人源抗体库


一、背景介绍


在人源抗体开发的诸多技术中,天然全人源抗体库技术以其高通量、高效率和靶点通用性的优点被越来越多的用到抗体先导分子开发中。一个高品质的人源抗体库需要解决库容量、多样性、插入率和包装效率等诸多问题,才能获得更高的筛选成功率和拥有良好生物活性的抗体候选分子。

 


二、构建原理


全人源噬菌体展示scFv抗体库是通过将人源抗体的可变区基因VH、VL和VK,轻重链通过拼接成scFv,scFv通过分子克隆重组到pCOMB3系列噬菌粒载体上,与M13噬菌体的PIII蛋白融合表达,在大肠杆菌内通过噬菌体复制增殖结合到噬菌体表面,形成噬菌体-基因-抗体唯一配对的噬菌体展示复合颗粒形式。


图片 2.png

人源scFv库构建流程


针对靶点蛋白筛选时,通过多轮抗原-抗体结合与洗脱富集,使特异性针对靶点蛋白的噬菌体展示复合颗粒富集,再通过ELISA等方式筛选出阳性单克隆菌株,便可通过测序得到针对靶点蛋白的抗体可变区序列。


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